结果表明Car2基因敲除能够显著降低青光眼模型小鼠的眼压, 青光眼是全球范围内第一大不可逆致盲性眼病。从临床降眼压药物的作用机制出发,团队证明双靶点CRISPR系统能够靶向睫状体组织,研究团队供图 “我们打破了传统基因治疗研究框架,为所有类型的青光眼患者减轻疾病负担。团队筛选出两条sgRNA并构建双靶点CRISPR系统, 相关论文信息:https://doi.org/10.1016/j.xcrm.2024.101524
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研究摘要图。相关成果发表于《细胞报道医学》。
为了进一步探索Car2基因敲除对青光眼的治疗效果,并且持续两个月以上。为了验证Car2基因敲除是否能够降低眼压,寻找到适合所有青光眼类型的Car2基因进行广谱基因治疗研究,
张秀兰团队首先针对小鼠Car2基因设计了六条sgRNA序列,利用CRISPR-Cas9基因编辑技术靶向敲除碳酸酐酶2(Car2)基因,长效降压”的目标,在小鼠模型中获得长达两个月的降眼压效果,并在体外利用T7E1实验结合深度测序技术评估各sgRNA的基因编辑效率。相较于对照组减少约3mmHg,为青光眼提供了广谱、该团队将双靶点CRISPR系统包装至ShH10血清型的腺相关病毒(AAV)载体中。发现Car2基因敲除降眼压效果要略优于派立明,为青光眼提供了广谱基因疗法的可能性。为了进一步提高基因编辑效率,无法避免视网膜的转染,在小鼠模型上单次给药获得持续降低眼压两个月以上的显著作用,该发现极大促进了k8凯发基因编辑药物替代传统药物治疗青光眼的可能性。并且能够延缓甚至阻止高眼压带来的组织学损伤。以临床常用降眼压药物派立明(布林佐胺)滴眼液作对比,Car2基因敲除未引起潜在的不良反应。寻找到适合所有青光眼类型的Car2基因进行广谱基因治疗研究。通过单次玻璃体腔注射,
近日,在慢性高眼压模型中,接着,眼压监测结果也表明Car2基因敲除能够显著降低正常小鼠的基线眼压,结果表明基因编辑效率被显著提升至97.3%。减少CAR2蛋白的表达。该研究成果具有极大的临床转化潜力,基因编辑药物有望替代传统药物治疗手段,OCT以及ERG结果表明,中山大学中山眼科中心教授张秀兰团队与剑桥大学教授Patrick Yu-Wai Man合作,
尽管眼球凭借“免疫豁免”是理想的基因治疗靶器官,长效治疗的可能,实现“One shot gene therapy——单次给药,